一、生物学方法 ( chemical assay )
酪胺酸酶活性抑制率测定
酪氨酸酶是黑素合成的主要限速,美白化妆品对酪氨酸酶活性的抑制必将减少黑素的生成,酪氨酸酶活性检测方法有:放射性同位素法、免疫学法和生化酶学法,以生化酶学法较为简单成熟。生物化学方法测定酪氨酸酶活性抑制的原理是:酪氨酸或多巴酸在酪氨酸酶的作用下转化为多巴醌,透过比色法测定判断不同美白剂对于酪氨酸酶活性的抑制率,该方法中较多使用蘑菇酪氨酸酶,用酪氨酸酶法来判定美白剂的效果虽然简单快捷,但是仍具有一定的局限性,它不能反映出美白剂是否能到达有效作用点,也无法反映出美白剂的其他作用机理。

二、细胞学方法
B16小鼠黑色素瘤细胞
此法被认为是美白化合物功效评价的最基本、最终指标,无论美白化妆品的作用原理是抑制酪氨酸酶活性,或者阻断信号传导途径,还是透过其它途径作用,其美白效果的最终评判要以黑素细胞中黑素含量是否降低为准则。目前美白活性物质的功效评价可采用生物化学(分光亮度法)测定黑素细胞中的黑素含量。另外也可用细胞图像分析技术测定黑素细胞中的黑素含量。在细胞水平的美白功效评价除了上述方法外,还包括MTT法测定黑素细胞增殖率方法、显微镜观察黑素细胞方法、分子生物学方法等。
测试项目
1. MTT法测定黑色素细胞的增值率
2. 黑色素含量
3. 酪胺酸酶活性
4.显微镜观察黑色素细胞型态
三. 人体试验方法
1. Mexameter方法
Mexameter MX16 是一窄谱反射分光亮度计,仪器探头的发射器发出波长分别为568nm(绿光)、660nm(红光)、880nm(红外光)三种波长的光照射在皮肤表面,接收器测得皮肤反射的光。发射器和接收器的位置保证了只有漫射光和散射光可以被测到,由于发射光的量是一定的,因此就可以测出被皮肤吸收的光的量。用公式计算黑素指数(melanin value)和红斑指数( hemoglobin values )评价化妆品的美白祛斑效果。
人体试用法一般以人体前臂皮肤为受试部位,以避免光照对于皮肤色度的影响。将美白剂涂于人体皮肤上,采用皮肤颜色测定仪,观察涂敷美白剂前后肤色的变化,以评价美白效果,皮肤肤色的测定可使用MEXAMETER MX16黑色素测定仪进行,该种图像分析技术是基于光谱吸收的原理,透过特定波长的光照在人体皮肤上的反射量来确定皮肤中黑色素含量,由于发射光的量一定,就可以计算出皮肤吸收光的量。
2 Chromameter法
Chromameter (Minolta Chromameter CR400)透过CIE L 3 a 3 b 3色度系统评价美白类化妆品的功效。评价肤色变化反应的是皮肤颜色的色彩变化,不仅能反映肤色的黑白变化,还能反映皮肤的变红、变黄等。因而在以肤色变化为观察终点的人体肤色分类及防晒、美白化妆品功效评价中得到了普遍应用。